صبغة البرت أو albert stain هي إحدى الطرق المعروفة للكشف عن البكتيريا، ويقدم لك موقع الموسوعة الغرض من هذه الصبغة ومكوناتها المعروفة، بالإضافة إلى الأدوات والخطوات الخاصة بهذه التجربة.
ما هو المقصود albert stain
تعد صبغة البرت أو Albert stain واحدة من التقنيات المعروفة لتمييز نوع محدد من البكتيريا، وتستخدم هذه التقنية لتوضيح تغيرات الألوان في نوع معين من بكتيريا الخناق الوتدية أو ما يعرف بـ “Corynebacterium diphtheria.
تستخدم هذه الصبغة لتمييز تغير الألوان في هذا النوع من البكتيريا، على سبيل المثال، عند صبغها باللون الأزرق، تظهر باللون الأحمر، بحيث يتم صبغ حبيبات فولتين في خلية البكتيريا.
مكونات صبغة البرت ستين
تتكون صبغة البرت albert stain من نوعين من الكواشف هما:
- يتكون النوع الأول من 15 غم من التولويدين الأزرق، و0.20 غم من مادة التلوين Malachite green، بالإضافة إلى مليلتر واحد من الحمض الجليدي الخلوي ومليلترين من الكحول.
- يحتوي النوع الثاني على 2 جرام من اليود بالإضافة إلى 3 جرام من يوديد الصوديوم
طريقة إجراء albert stain
الادوات المطلويبة لاجراء التجربة
- شريحة زجاجية نظيفة.
- كاشف البرت الاول A
- كاشف البرت الثاني B
- جهاز مجهر
- زيت يتم استعماله للغمر.
- ورق نشاف.
- مكان مخصص للصبغة.
خطوات عمل تجربة صبغة البرت ستين
من الضروري إعداد جميع متطلبات التجربة قبل البدء فيها، ثم اتباع الخطوات التالية:
- أعد واحدة من أغشية البكتيريا من أحد المستعمرات البكتيرية.
- يجب إحضار صبغة برايمر A الأولية التي تم إعدادها سابقًا.
- يتم غمر شريحة البكتيريا في صبغة البرت لمدة تتراوح بين 3 و7 دقائق.
- يجب التخلص من الزائد من الصبغة أولًا.
- بعد غسل الشريحة، يتم وضعها في صبغة البرت الثانية B التي تحتوي على اليود.
- لا تقم بغسل الشريحة في الماء حتى لا تتلف.
- ضع الشريحة في مكانها واتركها لمدة دقيقتين كاملتين.
- ينبغي التخلص أولاً من الصبغة الزائدة Albert stain B.
- ثم يجب غسل الشريحة بالماء العادي.
- قم بتجفيف الشريحة بالاستعانة بالورق النشاف.
- ضع الشريحة تحت المجهر وشاهدها.
نتائج التجربة
- بعد الانتهاء من التجربة، سيتم ملاحظة وجود بكتيريا الخناق الوترية في العينة وستظهر باللون الأخضر.
- تظهر البكتيريا في العينة بزوايا محددة بجوار بعضها البعض.
- البكتيريا تظهر بشكل حرف L وحرف V أو بشكل حروف صينية.
- تُستخدَم هذه التجربة للكشف عن وجود بكتيريا كورايني باكتيريا الدفتيريا وتمييزها عن غيرها من البكتيريا.
